O princípio básico da síntese de DNA

A síntese química do DNA é baseada na estratégia de síntese em fase sólida e na química da fosforamidita.Diferente da síntese biológica de DNA, o material na síntese química de DNA é DMT (4, 4-dimetoxitritil) e desoxirriboxídeo modificado com fosforamidita, conforme mostrado na Figura 1. A síntese de DNA é realizada no suporte sólido (podemos oferecer vários deColuna de Síntese Oligo), ou seja, CPG (vidro de poro controlado) e PS (poliestireno), e toda a síntese é realizada em umSintetizador de DNA/RNA, que é nosso principal equipamento, possui diferentes modelos como: Sintetizador de Canal Único HY, HY-12, HY-192 e etc, a direção de síntese é de 3' a 5', e um nucleotídeo é introduzido no suporte sólido através de um ciclo de síntese.Um ciclo de síntese normalmente contém quatro etapas: Desproteção, Acoplamento, Cobertura e Oxidação (Figura 2).A Desproteção é definida para remover o grupo DMT no suporte sólido ou o grupo hidroxila 5' no nucleosídeo anterior, o ácido tricloroacético a 3% em diclorometano é usado como reagente de desproteção.Em seguida, o desoxirriboxídeo modificado com fosforamidita foi deixado expor o grupo hidroxila com o auxílio do ativador, ou seja, 5-etiltiotetrazol ou 4,5-dicianoimidazol, formando o fosfittriéster (III), e realizada a etapa de acoplamento.Uma etapa de capeamento é realizada para bloquear o grupo hidroxila que não reagiu durante a etapa de acoplamento, para minimizar a formação de sequências de defeitos indesejadas.Finalmente, o fosfittriéster instável (III) é oxidado em fosfotriéster quimicamente estável (V) com iodo como oxidante na presença de piridina.

O DNA sintetizado pode ser clivado do suporte sólido por aminólise, o grupo protegido por 2-cianoetil no fosfotriéster e a amida na nucleobase são clivados ao mesmo tempo, as placas de síntese e as colunas de síntese em racks são colocadas diretamente na câmara de reação doEquipamento de desproteção.O DNA bruto pode ser preparado por HPLC, eletroforese e OPC sob demanda, também podemos fornecer a você oEquipamento de purificaçãopara pós-processamento.