Equipamento de purificação para purificação Oligo

1. Purificação por cromatografia por eletroforese em gel
Use cromatografia de eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante para purificação.O agente desnaturante é geralmente formamida 4M ou ureia 7M, a concentração de acrilamida está entre 5-15% e a proporção de metacrilamida está principalmente entre 2-10%.
Após a eletroforese, a posição da banda de ácido nucleico precisa ser determinada sob a irradiação de luz ultravioleta, o gel contendo o ácido nucleico alvo é cortado, o ácido nucleico é esmagado e lixiviado, e então a solução de lixiviação é concentrada, dessalinizada, quantificado e liofilizado.

2. DMT-On, purificação por HPLC
Escolha o modo DMT-On durante a síntese, o produto bruto foi centrifugado e concentrado em temperatura ambiente para remover o excesso de amônia após a aminólise.
A separação foi realizada utilizando uma coluna C18 com acetonitrila e 10% de ácido trietilamina-acético (TEAA) como eluente.Após a conclusão da eluição, ela é concentrada e então o grupo DMT é removido com ácido trifluoroacético.Após a neutralização, alguns sais e pequenas moléculas são removidos através de um tubo cortado e finalmente dessalinizados.

Este método pode obter um produto com maior pureza, mas é necessário atentar para a ocorrência de despurinação.

3. DMT-Off, purificação por HPLC
Escolha o DMT-Off durante a síntese, e o produto bruto foi centrifugado e concentrado à temperatura ambiente para remover o excesso de amônia após a amonólise.
A separação foi realizada utilizando uma coluna C18 com acetonitrila e 10% de trietilamina-ácido acético em água como eluente.Após a separação ser concluída e quantificada, as alíquotas são liofilizadas.

Este método requer um ajuste cuidadoso das condições de separação e também pode obter moléculas alvo relativamente puras.