Princípio do Sintetizador Oligo
Nos campos da biologia molecular e da pesquisa genética, a capacidade de sintetizar DNA desempenha um papel crucial.A síntese de DNA envolve a produção artificial de moléculas de DNA, organizando os nucleotídeos em uma ordem específica.Para conseguir isso, os cientistas contam com uma ferramenta poderosa conhecida como sintetizador de oligonucleotídeos, também conhecido como sintetizador de DNA.
Um sintetizador de oligonucleotídeos é um instrumento sofisticado que sintetiza automaticamente moléculas curtas de DNA chamadas oligonucleotídeos.Essas cadeias curtas de DNA têm normalmente de 10 a 100 nucleotídeos de comprimento e são blocos de construção essenciais em uma ampla variedade de aplicações, incluindo reação em cadeia da polimerase (PCR), síntese genética, engenharia genética e sequenciamento de DNA.
Os sintetizadores de oligonucleotídeos operam com base no princípio de uma técnica conhecida comosíntese em fase sólida.Este método foi pioneiro pelo ganhador do Nobel Dr. Marvin Caruthers na década de 1970 e foi refinado ao longo dos anos para melhorar a síntese de sequências de DNA.A síntese de oligonucleotídeos é realizada por uma adição gradual de resíduos de nucleotídeos ao terminal 5' da cadeia em crescimento até que a sequência desejada seja montada.Cada adição é chamada de ciclo de síntese e consiste em quatro reações químicas:
Etapa 1: Desbloqueio (destritilação) ---------Etapa 2: Acoplamento ---------Etapa 3: Limite -----------Etapa 4: oxidação
Este processo é repetido para cada nucleotídeo até que a sequência desejada seja obtida.Para oligonucleótidos mais longos, este ciclo pode necessitar de ser repetido várias vezes para sintetizar a sequência inteira. A capacidade de controlar com precisão cada etapa do ciclo de síntese é crítica para um sintetizador de oligonucleotídeos.Os reagentes utilizados, como nucleotídeos e ativadores, precisam ser de alta qualidade para garantir uma síntese precisa e eficiente.Além disso, os sintetizadores requerem controle de temperatura de alta precisão e outras condições ambientais para promover reações de acoplamento desejadas e prevenir reações indesejadas.
Uma vez totalmente sintetizado, um oligonucleótido é tipicamente clivado do suporte sólido e purificado para remover quaisquer grupos protectores ou impurezas restantes.Os oligonucleótidos purificados estão então prontos para aplicações a jusante.
Os avanços na tecnologia permitiram o desenvolvimento de sintetizadores de oligonucleotídeos de alto rendimento, capazes de sintetizar simultaneamente centenas ou mesmo milhares de oligonucleotídeos.Esses instrumentos usam tecnologia de síntese baseada em microarranjos, permitindo aos pesquisadores gerar rapidamente grandes bibliotecas de oligonucleotídeos para diversos fins de pesquisa.
Em resumo, os princípios por trás dos sintetizadores de oligonucleotídeos giram em torno de técnicas de síntese em fase sólida, que envolvem a adição gradual de nucleotídeos em um suporte sólido.O controle preciso do ciclo de síntese e reagentes de alta qualidade são essenciais para uma síntese precisa e eficiente.Os sintetizadores Oligo desempenham um papel vital na pesquisa de DNA, permitindo que os cientistas gerem oligonucleotídeos personalizados para uma variedade de aplicações, contribuindo para avanços na biotecnologia e na pesquisa genética.
Horário da postagem: 01/08/2023